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杀灭菊醋降解菌菌株的分离鉴定和降解纯化酶的特性研究

阎华 于博

湖北文理学院食品科学技术学院  

摘要:从湖北省襄阳市南漳王冠茶园表层土分离得到降解杀灭菊酷农药的菌株TK-2。菌株TK-2革兰氏染色为阴性,镜检为长棒状,生理生化特征和16S rDNA序列特征符合铜绿假单胞菌典型特征,综合鉴定其为铜绿假单胞菌。TK-2在添加杀灭菊酮的无机盐培养基培养72h后,获得最高产量的杀灭菊酷降解酶,酶活力为108 U/mL,TK-2杀灭菊酷降解酶经过DEAE-52和CM-52纯化后,纯化倍数达到3.4倍,酶活力回收率达到562%,凝胶电泳后分析得到酶的分子量为83.6 kDa。TK-2杀灭菊酶降解纯化酶酶促反应的最适温度是35°C25~45°C稳定性良好,酶促反应的最适pH值是8.0,pH 7.0~9.0稳定性良好,对底物反应的米氏常数Km是0.738 mmol/L,最大反应速率Vmax是1.123 mmol/ (Lmin)。
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